支原體檢測試劑盒（經典法）（含Taq酶）

Venor® Gem Classic

支原體檢測試劑盒（經典法）（含Taq酶） 特點

1.內(nei)控對照為獨立包裝(zhuang)，遵循歐洲藥典(dian)和日本(ben)藥典(dian)操作(zuo)流程。

2.高特異性(xing)，僅一條(tiao)陽性(xing)對(dui)照(zhao)條(tiao)帶，即可涵蓋所有可能感(gan)染(ran)細胞的支原(yuan)體(ti)物(wu)種。操作簡單(dan)，

易于觀(guan)察(cha)。

3. 高(gao)靈敏(min)度(du)，若PCR反應(ying)體系(xi)加(jia)入10μl樣本，支原體檢測限度為≤5或≤10CFU。

(詳見(jian)下(xia)文“(2)Venor® Gem Classic Kit 10種常(chang)見(jian)支原體檢測限(xian)“)

4.歐洲藥典(dian)要求的26種(zhong)(zhong)支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體均可(ke)檢(jian)出(chu)。該試劑盒可(ke)檢(jian)測出(chu)1種(zhong)(zhong)脲原(yuan)(yuan)(yuan)體、7種(zhong)(zhong)無(wu)膽甾(zai)原(yuan)(yuan)(yuan)體和(he)85種(zhong)(zhong)支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體，與細菌和(he)真核DNA無(wu)交叉(cha)反應(ying)。

5.試劑盒內包含(han)Taq酶，無需另(ling)外(wai)購買。

Venor® Gem Classic Kit

10種常見(jian)支原體檢測限

操(cao)作步驟

第1步：樣本(ben)處(chu)理

a. 細(xi)胞(bao)培養上清

b. 生物(wu)藥或(huo)需遵循藥典的樣(yang)本(ben)

說明：①樣(yang)品基(ji)質可能會影響檢測(ce)的(de)靈敏(min)度(du)。收(shou)集和篩選更高(gao)(gao)的(de)樣(yang)品量可提高(gao)(gao)測(ce)定靈敏(min)度(du)。

 ②細胞培養物樣本含豐富的DNA酶，在低(di)溫下也能降解支原DNA，影響(xiang)檢(jian)測靈敏度。

建議(yi)：樣本做DNA抽提處理，實現高(gao)靈敏度(du)。

推薦：德國MB公(gong)司(si)生產(chan)的支原體DNA提取試(shi)劑盒(he)Venor® Gem Sample Preparation Kit該DNA抽提試(shi)劑盒(he)已經(jing)過廣泛(fan)驗證。

第2步：試劑(ji)制備

第3步：PCR體系建(jian)立

a. 細胞培養上(shang)清(qing)

b. 生物藥(yao)或需遵循藥(yao)典的樣本

第4步：啟動PCR反應

第5步：電泳結(jie)果(guo)分(fen)析

191bp為內控對照(zhao)條帶，表明(ming)PCR反應正常。

當(dang)樣本存(cun)在(zai)支(zhi)(zhi)原(yuan)體污染時，由于內控對(dui)(dui)照(zhao)與支(zhi)(zhi)原(yuan)體DNA存(cun)在(zai)競爭，內控對(dui)(dui)照(zhao)條帶變弱（例如支(zhi)(zhi)原(yuan)體DNA＞103拷貝）。

陽性(xing)對照中支原體DNA＞104拷貝，內控對照條帶會*消失。

可能在80-90bp存(cun)在引物自退(tui)火形成的條(tiao)帶(dai)，此條(tiao)帶(dai)不影(ying)響檢測結果。

如(ru)果(guo)待(dai)測樣本對(dui)PCR產生抑(yi)制，則內控對(dui)照條(tiao)帶變弱（和陰性對(dui)照相(xiang)比(bi)），此(ci)時應先進行DNA抽(chou)提（推薦使用：Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原(yuan)體DNA抽(chou)提試劑(ji)盒，詳見(jian)第25頁），然(ran)后再檢測。

儲存條件

2~8℃至少6個月。復溶后(hou)在-18℃保存(cun)。